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阿曼尼酒吧发生凶杀案，死者是酒吧老板林志海和他的情人罗婷婷，市刑侦大队周大鹏率队在现场勘查，从现场死者遇害后的位置、报案人的回忆、相关者的调查取证、以及吧台底下一个蓝色打火机等现场言证、物证，周大鹏和他的队员们将疑犯初步锁定在酒吧收银员胡晓萍、林志海的妻子刘婕、钟情于罗婷婷的腾义三个人身上。。正就读中学的少年迈尔斯意外被一只遭受放射性污染的蜘蛛咬伤，随后身体发生奇特的变化。偶然机缘，他目睹了蜘蛛侠和犯罪头目金并的战斗。为了阻止金并利用时空对撞机扰乱宇宙，蜘蛛侠最终壮烈牺牲。可未过多久，来自平行宇宙的颓废的彼德·帕克出现在迈尔斯面前。为了阻止金并的阴谋，并帮助这个帕克返回自己的宇宙，他们闯入金并的老巢。在这一过程中，二人遭到章鱼博士和徘徊者的狙击。与此同时，来自其他宇宙的女蜘蛛侠、暗影蜘蛛侠、蜘猪侠、二次元蜘蛛妹相继出现。 他们合力与恶势力展开斗争……。